最新淡水蛙病毒病的防治技术方法

   蛙病毒病是由美国青蛙病毒及虎纹蛙病毒等感染引起的疾病。
   (一)病原
   美国青蛙病毒(RGV)属虹彩病毒科、蛙病毒属，病毒颗粒呈球形，直径约150纳米，双股脱氧核糖核酸，无囊膜；能在草鱼卵巢细胞、鲤上皮乳状瘤细胞、鳗性腺细胞、草鱼鳍细胞株上增殖，约1周细胞产生病变；培养温度对美国青蛙病毒扩噌有明显影响，在20-30℃范围内，随温度升高细胞病变时间缩短，病毒滴度增加，30℃是病毒最适合的增殖温度；当温度相同时，不同的细胞对病毒的敏感性不同，相对来说草鱼鳍细胞更敏感。病毒颗粒分散或呈晶格状排列。
   苗素英等(2001、2002)报道，从患病虎纹蛙中分离到的病毒，为20面体的胞浆内脱氧核糖核酸病毒，属虹彩病毒科。其主要衣壳蛋白(MCP)基因的核苷酸序列与蛙病毒属的代表种蛙病毒—3型(FV3)的同源性98％，甲基转移酶基因与蛙病毒属的蛙病毒—3型、叉尾鮰病毒等的一致性为96％-97％，而主要衣壳蛋白基因的3′端与其他脊椎动物虹彩病毒比较，核苷酸序列均有所不同，所以应是虹彩病毒科蛙病毒属的1个新成员，暂将其命名为虎纹蛙病毒(RTV)。能在鲤上皮乳状瘤细胞(EPC)黑头软口鲦尾柄上皮样细胞(FHM)及草鱼卵巢细胞(CO)上产生空斑状的细胞病变。该病毒对氯仿、热(56℃30分钟)和酸(pH 3)敏感，对碱(pH 14处理1小时仍有微弱感染力)有一定抗性。病毒颗粒直径125纳米左右(王晓红等)。
   (二)流行情况
   主要危害美国青蛙(又称沼泽绿牛蛙)、变态不久的幼蛙及虎纹蛙；病程短，蔓延极快，一旦发病，仅2天左右蛙群中的死亡率高达90％。
   (三)症状
   病蛙精神不振，行动迟缓，食欲减退，接着在蛙的体表有出血点，幼蛙背部皮肤开始仅局部坏死脱落，很快烂斑扩大，病情不断加重；头背部皮肤失去光泽，出现白色花纹，表皮脱落，溃烂，并露出背肌；腹部皮肤有出血点，四肢发红、溃烂；有的指及趾部充血、出血或溃烂。病重的蛙很消瘦，解剖发现肠壁严重充血，肠内无食物，有的肝或胆囊肿大，不久即死。
   (四)诊断
   (1)根据症状及流行情况进行初步诊断。
   (2)确诊需进行超薄切片，透射电镜观察，或进行病毒分离培养。
   (3)采用聚合酶联反应进行快速检测。
   (4)谢简等(2002)报道，用免疫组化法检测，可作为疾病早期诊断，不仅灵敏、准确、快速、费用低、操作相对简单，且可以定位，能检测到动物体内的受侵害程度以及病毒侵染的靶目标，进而可以用于研究病毒入侵宿主的途径和疾病的发展过程。
   (五)预防措施
   (1)养蛙场地、水体、工具及食台进行打扫、清洗、消毒。尤其是食台及工具要天天打扫，定期消毒。
   (2)严格执行检疫制度，不从疫区购进蛙种。
   (3)加强饲养管理，投喂营养全面的优质饲料(不能投喂病死鱼、病死蛙、腐败变质的饲料等)，泼洒养殖保、玉垒菌等，保持环境优良、稳定，提高蛙体抵抗力。
   (4)注射蛙病毒疫苗(灭活细胞疫苗)，免疫保护率高达95％，该疫苗已由中国科学院水生生物研究所申请到发明专利。
   (六)治疗方法
   尚未进行研究。