发病笋壳鱼分离出链球菌

广东江门市荷塘六坊市场一笋壳鱼养殖池塘,面积4亩,水深1.5-2米,3台增氧机(图1)。2017年4月6日,放规格3cm/尾的笋壳鱼苗种4.5万尾,放苗时水温约22℃,投喂鲮鱼仔,早上喂一次,130斤/亩塘。
2017年5月下旬开始发病,发病初期每天死亡3-30尾,后期每天死亡上百尾。发病鱼漂浮于池塘边的水面上、很少见“打转”,有的鱼体表有溃烂、稍显黄身、鳃丝糜烂。5月中旬池塘水亚硝盐偏高,简易测试盒检测0.35mg/L,发病前期用药比较乱,用杀孢子虫的药后死亡量增多,大换水后死亡量也增多。
6月份雨水多,死亡量增加。
2017年7月14日现场采样,测定水温32℃,当天死亡200尾左右,发病鱼规格全长7-10cm。取发病的6尾笋壳鱼(图2、3),外观病鱼体表、鳃丝溃烂,稍显“黄身”,腹部充血(图4);解剖肝脏颜色变淡、脾脏肿大(图5)。取每尾鱼的肝脏、脾脏接种营养琼脂培养基进行细菌分离培养,取发病鱼的肝、肾、脾、脑、肌肉等组织,分别用95%酒精和波恩氏液固定做病毒检测和组织病理切片观察。
结果:在28℃经24小时培养,每个培养基上均长出乳白色、圆滑的菌落,16SrDNA分子鉴定为气单胞菌;其中“7-5肝脏”培养基上还长有针尖大小、乳白色菌落(图6),革兰氏染色为阳性、链状排列,16SrDNA分子鉴定为海豚链球菌(图7)。PCR检测虹彩病毒和神经坏死病毒均呈阴性。病理切片显示脾脏组织稀疏,轻微淤血(图8);脑部局部轻微淤血、出血(图9);肝脏脂肪变性(图10);鳃部多量红染质团,鳃小片弯曲、散在细胞坏死(图11)。
7月15日,当天死亡约200尾,开始用恩诺沙星、硫酸新霉素、盐酸多西环素拌冰鲜鱼内服,连续使用5天,死鱼数量逐渐减少。
7月20日至8月10日,每天死鱼约30-40尾。
8月10日之后,每天偶尔死鱼1-2尾。
分析:1、本病例检测发病鱼虹彩病毒和神经坏死病毒呈阴性,发病鱼均有气单胞菌感染,发病后期连续使用抗菌药物后死亡量有所下降,死亡可能与感染细菌有关。其中一尾鱼肝脏中分离出链球菌,症状较其它鱼严重,可能是感染海豚链球菌加重病情。
2、海豚链球菌能引起多种养殖鱼类脑膜炎和败血症死亡,笋壳鱼海豚链球菌病未见报道。海豚链球菌是非条件致病菌,侵袭能力较强,但据报道并非所有的都是致病株,存在不致病的共生菌株,本病例分离的海豚链球菌是否对笋壳鱼致病尚不能确定。(利洋公司研究所一室 胡芳源 戚瑞荣 席云清提供2017.10.19 )



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