食用菌制种实用技术

随着食用菌产业的蓬勃发展，对菌种的需求越来越大，而现有的菌种生产单位明显少了，很多菇农不得不到外面引进。长途购买和运输菌种，不仅成本高，还会因破瓶造成杂菌污染，严重影响食用菌栽培的经济效益。菇农如果能掌握菌种生产程序和制种技术，自己实践制种，逐步发展成为制种专业户，也是一条致富的好路子。菌种的生产程序通常分为母种、原种和栽培种三个层次，通常称为一级、二级和三级菌种。其中，亲本物种的分离育种技术含量高，需要精细化；而原生种和栽培种的生产相对简单。下面描述各种菌株的生产技术。

母种的隔离和繁殖

种子主要通过人工选择、诱变育种、杂交育种和原生质体融合获得。作为一个普通的种子生产专员，你可以用人工选择来分离和培育母种。具体步骤和操作方法如下。

1.收集种源：从野生成年栽培群体中选择有代表性的优良菇体作为种源。香菇栽培的标准是：八成熟，圆形花形，肉质，无病虫害。收集1-2个符合上述标准的种菇，编号作为分离母种的材料。从培养室采集的应标有原始菌株代码。

2.培养基的准备琼脂培养基，又称PDA培养基，常用如下：土豆200-250g，琼脂15-20g，葡萄糖20-25g，清水1000ml。还可加入硫酸镁1-1.5g、微量维生素B1和磷酸二氢钾2-3g。土豆洗净去皮，切成薄片，放入铝锅中加水煮沸30分钟，捞起，用4层纱布过滤，取汁。然后在汁液中加入琼脂，边加热边搅拌，使琼脂充分溶解；加入葡萄糖等。煮几分钟，用4层纱布过滤取汁。趁热把果汁放入玻璃试管中。至管长的1/5，用棉花塞住管口，或将果汁装入容量为20ml的玻璃三角瓶中。然后放入高压锅中，在98-108 kPa/cm的压力下杀菌30分钟左右。灭菌后及时取出，趁热将试管斜放在桌上，冷却后成为固体斜面培养基。

3.亲本种子分离的方法有三种：孢子弹射法、组织分离法和基内分离法。孢子弹射法。将种菇表面消毒，吸水后将菇体悬挂在装有琼脂培养基的三角瓶中，使菇体内的菌衣自然散开在培养基上萌发菌丝。也可以切一小块蘑菇体，贴在试管斜面培养基表面，使孢子散布在培养基上萌发菌丝，获得母种；组织分离法。在接种箱中，用手将消毒后的种菇从菇柄上解开一半，或用刀片切割成裂开的菇体。在菌盖与菌柄连接处或菌褶处用接种刀切下一小片菇体，然后纵向切成5mm10mm的小片，用接种针挑取一片，连接在斜面培养基的中心，在每个试管中接种一小片，等待其菌丝萌发，即可得到母种；(3)碱基内分离法。选取有蘑菇的木段，切去树皮和表面木质部，用70%酒精消毒，锯成1cm厚的薄片，放入0.1%升汞水中消毒1-2分钟，再用无菌水冲洗残液。然后将小切片劈成宽度为0.5-1cm的小条，插入斜面培养基的中央，待菌丝生长后即得到母种。或者经消毒处理后，用接种针钩取袋内颜色纯正、生长旺盛的菌丝体，接种于试管斜面培养基中央。菌丝体萌发后，可获得相同的菌株。

4.合适的温度cu

5.育种和提纯上述方法得到的菌丝不一定质量高，也需要育种和提纯。因此，菌丝萌发后，要仔细观察，挑选纯净、健壮、正常、无间断的菌丝，与接种盒中的培养基勾在一起，连接到另一个试管培养基上。在23-25的恒温条件下，培养7-10天。菌丝长满管后，观察选择最好的，就是“母代”母种。

6.试管转移和扩展母-子可以转移和扩展成“子代”母-子。使用相同的斜面培养基，每个分支可以用30-50个支子替代物扩增。世界上供应的大部分产品都是子代和母种。它可以再次扩展。一般每支可扩至20-25支支子代替品，但转管次数不得超过5次。

7.必须进行结实试验，以隔离和繁殖亲本种子。方法：将母种接种于瓶装或袋装的木屑培养基上，根据各种菇耳种的温度要求进行适宜的温度培养，直至出菇，即可用于生产。

原始物种的繁殖和培养

将母种接入瓶或袋中的木屑培养基中，培养得到原种。其技术要求如下。

1.原木屑培养基配方为木屑77.5%，麦麸20%，蔗糖1%，石膏粉1.2%，硫酸镁0.3%。pH值(灭菌前)为6.5-7，含水量调整至60%。将上述原料和辅料混合，装入750ml玻璃滤瓶中。装载要求有松有紧。在瓶口塞棉花，然后用牛皮纸包住瓶颈和棉花塞。然后放入高压灭菌锅中，在147 kPa/cm2压力下灭菌2-2.5小时。也可常压灭菌，100保温10-11小时，达标后趁热取出，冷却。

2.接种菌株。当饲养温度降至25以下时，在灭菌条件下，将试管种子分成几块，通过酒精灯的火焰迅速接种到原种子培养基中。每个亲本种子可以包含4-6瓶原种。

3.接种后，及时将玻璃菌种瓶移入25的菌种培养室进行培养。空间相对湿度应控制在70以上，避免强光照射。一般培养原种需要40-50天，草菇和银耳只需要15-20天。

4.在原种繁育的过程中，每天都要观察。如有杂菌污染，应立即消除。

栽培品种扩展和栽培

原种在同一木屑培养基上再次扩繁，然后在适宜的温度下培养30-35天，即为栽培种(也称生产种)，可用于生产栽培。可使用750ml专用瓶进行培养。由于使用量大，通常使用聚丙烯应变袋。包包尺寸有12cm x 24cm，15cm x 28cm，17cm x 33cm等。可根据各种菇耳特点和当地风俗习惯选择使用。培养基在常压灭菌烘箱中灭菌，灭菌温度要求达到100，灭菌时间8-10小时。达标后热，拆包，冷却。当物料温度降至25以下时，在无菌条件下接种所选品种的原种。每瓶原种可扩大到50-60瓶栽培种。培养室要清洁，避光，室温保持在23-25，并经常检查。如发现杂菌污染应及时消除，选择最好的，不断消除最差的。当菌丝长满袋，菌丝反向向上爬1-3cm时，为适宜栽培种。